{"id":304,"date":"2025-01-28T11:12:33","date_gmt":"2025-01-28T13:12:33","guid":{"rendered":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/?page_id=304"},"modified":"2026-02-25T23:11:53","modified_gmt":"2026-02-26T01:11:53","slug":"montagem-em-laminas","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/montagem-em-laminas\/","title":{"rendered":"Montagem em l\u00e2minas"},"content":{"rendered":"\t\t
\n\t\t\t\t\t\t
\n\t\t\t\t\t\t
\n\t\t\t\t\t
\n\t\t\t
\n\t\t\t\t\t\t
\n\t\t\t\t
\n\t\t\t\t\t\t\t


<\/a><\/span>Um aspecto importante do trabalho de um pesquisador \u00e9 a capacidade de realizar a montagem de uma l\u00e2mina histol\u00f3gica\/de microscopia<\/span> para an\u00e1lise de materiais diversos. Independentemente da \u00e1rea de estudos, mas especificamente no dom\u00ednio da microbiologia, conhecer os protocolos de montagem de l\u00e2mina \u00e9 imprescind\u00edvel para um aproveitamento adequado dos materiais e da realiza\u00e7\u00e3o de avalia\u00e7\u00f5es de qualidade de esp\u00e9cimes.\u00a0<\/span><\/p>

\u00a0<\/span><\/p>

Neste momento iremos demonstrar como s\u00e3o feitas montagens de l\u00e2minas de organismos microsc\u00f3picos e como observ\u00e1-los em diferentes aumentos, bem como explicar como um bom pesquisador possui a capacidade de representa\u00e7\u00e3o das estruturas observadas. Para entender o protocolo a seguir tenha em mente as funcionalidades do\u00a0<\/span><\/span>microsc\u00f3pio \u00f3ptico<\/a>.<\/span><\/span><\/p>

\u00a0<\/span><\/p>

MONTAGEM EM L\u00c2MINAS<\/strong><\/span><\/p>

O material para exame deve ser montado em l\u00e2minas de vidro especiais para microscopia e recoberto com lam\u00ednula, tamb\u00e9m de vidro. A l\u00e2mina deve estar limpa, sendo um bom crit\u00e9rio para avaliar sua limpeza a coloca\u00e7\u00e3o de uma gota de \u00e1gua sobre a mesma. Se a gota se espalhar, tendendo a ocupar ampla superf\u00edcie, a l\u00e2mina pode ser considerada limpa, caso contr\u00e1rio deve ser novamente lavada. As l\u00e2minas podem ser lavadas com detergente e guardadas em \u00e1lcool 70%.<\/span><\/p>

Seguem os passos para uma boa prepara\u00e7\u00e3o de l\u00e2mina:<\/span><\/p>

  1. Com uma l\u00e2mina em m\u00e3os, \u00e9 necess\u00e1rio colocar uma gota do meio que se deseja estudar sobre ela com o aux\u00edlio de um conta-gotas e o material a ser examinado, com um estilete, pin\u00e7a ou pincel.\u00a0<\/span><\/li>
  2. Se necess\u00e1rio, o material pode ser dissociado com ajuda de dois estiletes, observando-se \u00e0 lupa. A prepara\u00e7\u00e3o realizada \u00e9 coberta com uma lam\u00ednula, tomando cuidado para evitar a forma\u00e7\u00e3o de bolhas de ar pelo encaixe da lam\u00ednula em angula\u00e7\u00e3o de 45\u00ba sobre o l\u00edquido.<\/span><\/li>
  3. O excesso de l\u00edquido de montagem, que extravasa pelos bordos da lam\u00ednula, deve ser retirado com papel absorvente, evitando-se que a platina do microsc\u00f3pio seja molhada.<\/span><\/li>
  4. A substitui\u00e7\u00e3o de um l\u00edquido de montagem por outro, por exemplo, um corante, pode ser feita sem a remo\u00e7\u00e3o da lam\u00ednula. Para isso, coloca-se uma gota do novo l\u00edquido na borda da lam\u00ednula. Do outro lado da lam\u00ednula \u00e9 necess\u00e1rio encostar um peda\u00e7o de papel de filtro que, por capilaridade, ir\u00e1 transferir o l\u00edquido antigo para si e mover\u00e1 o corante para a regi\u00e3o da amostra.<\/span><\/li>
  5. Uma prepara\u00e7\u00e3o em l\u00e2mina pode ser mantida, por curtos per\u00edodos, em uma c\u00e2mara \u00famida feita com placa de Petri, evitando que a \u00e1gua evapore rapidamente da amostra.<\/span><\/li><\/ol>
    \u00a0<\/span><\/div>

    CARACTER\u00cdSTICAS DE UMA BOA MONTAGEM<\/strong><\/span><\/p>

    Uma l\u00e2mina corretamente preparada deve apresentar as seguintes caracter\u00edsticas para permitir uma boa observa\u00e7\u00e3o:<\/span><\/p>

    \u2013 Ser isenta de bolhas de ar;<\/span><\/p>

    \u2013 Conter pequena quantidade de material, pois as prepara\u00e7\u00f5es muito densas impedem a passagem de luz;<\/span><\/p>

    \u2013 Ter l\u00edquido em toda extens\u00e3o entre l\u00e2mina e lam\u00ednula;<\/span><\/p>

    \u2013 A lam\u00ednula n\u00e3o estar flutuando (o excesso de l\u00edquido pode ser retirado com papel absorvente);<\/span><\/p>

    \u2013 Nunca haver l\u00edquido sob a l\u00e2mina;<\/span><\/p>

    \u2013 A platina do microsc\u00f3pio n\u00e3o ser molhada no processo de montagem.<\/span><\/p>

    \u00a0<\/span><\/p>

    L\u00c2MINA SOBRE DIFERENTES AUMENTOS<\/strong><\/span><\/p>

    Para visualiza\u00e7\u00e3o e compreens\u00e3o das l\u00e2minas histol\u00f3gicas em diferentes aumentos, \u00e9 necess\u00e1rio que os alunos entendam que:\u00a0<\/span><\/p>

    (1) cada objetiva possui uma capacidade de amplia\u00e7\u00e3o da imagem formada diferente;\u00a0<\/span><\/p>

    (2) cada aumento tem como vantagem a visualiza\u00e7\u00e3o de estruturas menores e com mais clareza em uma determinada \u00e1rea da l\u00e2mina;<\/span><\/p>

    (3) que cada aumento tem como desvantagem a diminui\u00e7\u00e3o do campo de vis\u00e3o geral da l\u00e2mina;\u00a0<\/span><\/p>

    Tomemos uma l\u00e2mina de um <\/span>Paramecium<\/span><\/i> sp., preparada com intuitos did\u00e1ticos, em meio natural e sem adi\u00e7\u00e3o de corante. Cada objetiva possibilita uma resolu\u00e7\u00e3o das imagens formadas. Na disciplina se utilizam os aumentos de 40x, 100x e 400x, apesar de existirem situa\u00e7\u00f5es extra-classe em que aumentos diferentes devem ser empregados. O aspecto geral da l\u00e2mina em aumento de 40x deve apresentar algumas informa\u00e7\u00f5es sobre o organismo e o substrato em que vive, ou n\u00e3o, associado. Tomemos a foto em aumento de 50x, muito pr\u00f3ximo da vista em aula.<\/span><\/span><\/p>

    \u00a0<\/span><\/span><\/p>

    \"\"<\/a>Figura 1. Aumento de 50x de uma \u00e1rea de l\u00e2mina com Paramecium sp<\/em>.<\/span><\/p>

    Quando se pretende obter mais informa\u00e7\u00f5es sobre os organismos, aumentos maiores devem ser empregados. A utiliza\u00e7\u00e3o do aumento de 100x por exemplo, gerar\u00e1 algumas consequ\u00eancias em rela\u00e7\u00e3o ao aumento anterior. A primeira consequ\u00eancia \u00e9 a capacidade de observa\u00e7\u00e3o de estruturas menores, importante para descri\u00e7\u00e3o e identifica\u00e7\u00e3o dos organismos. A segunda consequ\u00eancia \u00e9 a diminui\u00e7\u00e3o do campo de vis\u00e3o antes obtido pela objetiva anterior.\u00a0<\/span><\/p>

    \"\"<\/a><\/span><\/p>

    Figura 2. Aumento de 100x dentro do aumento de 50x.<\/span><\/p>

    Observe a imagem em aumento de 100x e a compare com a de 40x. A regi\u00e3o enfocada passa a ter mais \u00eanfase e ganha mais detalhamento em rela\u00e7\u00e3o ao restante da l\u00e2mina. A regi\u00e3o em cinza \u00e9 tudo que podia ser visto na imagem anterior, mas que no aumento de 100x n\u00e3o \u00e9 mais evidenciado.\u00a0<\/span><\/p>

    \"\"<\/a><\/span><\/p>

    Figura 3. Detalhe do aumento de 100x.<\/span><\/p>

    Note algumas das estruturas apontadas. A estrutura apontada com uma cabe\u00e7a de seta amarela se trata de uma bolha de ar e \u00e9 facilmente identificada pelo formato circular com bordas duplas bem delimitadas, uma externa mais escura e uma interna mais clara. Essa estrutura estava clara na imagem anterior? Voc\u00ea diria que ela podem ser melhor diferenciada em qual das duas imagens?\u00a0<\/span><\/p>

    \"\"<\/a><\/span><\/p>

    Figura 4. Aumento de 400x dentro do aumento de 100x.<\/span><\/p>

    Em um aumento ainda maior fica claro detalhes que antes pareciam invis\u00edveis em aumentos diferentes. Compare a imagem de aumento 100x e de 400x e tente descrever as mudan\u00e7as observadas, principalmente no reconhecimento das estruturas celulares do <\/span>Paramecium<\/span><\/i>.<\/span><\/span><\/p>

    \u00a0<\/span><\/p>

    \"\"<\/a><\/p>

    Figura 5. Detalhe de um dos aumentos de 400x.<\/span><\/p>

    \"\"<\/a>
    Figura 6. Detalhe de outro aumento de 400x.<\/span><\/p>

    Observado separadamente cada detalhe, na figura 5, a cabe\u00e7a de seta amarela representam os tricocistos secretados que auxiliam na defesa do organismo; ao passo que a cabe\u00e7a de seta vermelha \u00e9 uma estrutura n\u00e3o identificada, possivelmente conte\u00fado citoplasm\u00e1tico de outro Paramecium<\/em> que morreu durante a montagem da l\u00e2mina. Na figura 6, por sua vez, \u00e9 poss\u00edvel identificar os c\u00edlios\u00a0 do Paramecium<\/em> apresentado, pela cabe\u00e7a de seta amarela, e a estrutura da bolha em uma defini\u00e7\u00e3o melhor, pela cabe\u00e7a de seta vermelha.<\/span><\/p>

    REPRESENTA\u00c7\u00c3O GR\u00c1FICA<\/strong><\/span><\/p>

    Em nossas aulas pr\u00e1ticas, n\u00e3o ser\u00e1 empregada a objetiva de maior aumento (de imers\u00e3o) porque ela requer o uso de \u00f3leo de imers\u00e3o e oferece uma resolu\u00e7\u00e3o n\u00e3o muito superior \u00e0 objetiva de aumento m\u00e9dio.<\/span><\/p>

    A representa\u00e7\u00e3o de organismos microsc\u00f3picos (e organismos em geral) requer cuidadosa sele\u00e7\u00e3o de partes e estruturas espec\u00edficas para serem documentadas. Geralmente se inicia pelo aspecto geral, em observa\u00e7\u00e3o macrosc\u00f3pica, depois em lupa e finalmente ao microsc\u00f3pio. Neste \u00faltimo, se inicia com a objetiva de menor aumento, passando para aumentos maiores conforme o que se pretende observar.<\/span><\/p>

    Uma boa ilustra\u00e7\u00e3o vem acompanhada de legendas claras e bem pensadas, contendo o aumento a qual a ilustra\u00e7\u00e3o foi baseada, indica\u00e7\u00f5es das estruturas apontadas corretamente sobre a extremidade das mesmas, tra\u00e7os bem vis\u00edveis e, quando necess\u00e1rio, cores representativas para diferenciar estruturas diferentes e que n\u00e3o se misturem com a ilustra\u00e7\u00e3o em si.<\/span><\/p>

    No final das aulas, \u00e9 importante verificar se os aparelhos \u00f3pticos e as bancadas est\u00e3o em ordem e limpos, sendo um dever de cada aluno manter o espa\u00e7o de aulas pr\u00e1ticas devidamente organizado.<\/span><\/p>\t\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/section>\n\t\t\t\t<\/div>\n\t\t","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Um aspecto importante do trabalho de um pesquisador \u00e9 a capacidade de realizar a montagem de uma l\u00e2mina histol\u00f3gica\/de microscopia para an\u00e1lise de materiais diversos. Independentemente da \u00e1rea de estudos, mas especificamente no dom\u00ednio...<\/p>\n","protected":false},"author":24390,"featured_media":0,"parent":0,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"page-templates\/child-menu.php","meta":{"footnotes":"","_links_to":"","_links_to_target":""},"class_list":["post-304","page","type-page","status-publish","hentry"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/304","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/wp-json\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/wp-json\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/wp-json\/wp\/v2\/users\/24390"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=304"}],"version-history":[{"count":4,"href":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/304\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":738,"href":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/304\/revisions\/738"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/sites.usp.br\/dbf\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=304"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}