Biotecnologista pela Universidade Federal de Goi\u00e1s (UFG). Atualmente mestranda do programa de Bioqu\u00edmica e Biologia Molecular da Universidade de S\u00e3o Paulo (USP). Possui como projeto de pesquisa a purifica\u00e7\u00e3o e caracteriza\u00e7\u00e3o de enzimas lignocelul\u00edticas, sob a orienta\u00e7\u00e3o do prof. Dr. Felipe Chambergo. Tem interesse nas \u00e1reas de microbiologia aplicada, bioprocessos, biologia molecular, biologia celular e bioqu\u00edmica.<\/p>\n
N\u00b0 USP: 11866640<\/p>\n
E-mail USP: vandy.melo@usp.br<\/p>\n
N\u00b0 ORCID:<\/p>\n
Link CV Lattes<\/a><\/p>\n Forma\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\n 1- Gradua\u00e7\u00e3o: Bacharel em Biotecnologia Data de conclus\u00e3o: 28\/01\/2020<\/p>\n IES: Universidade Federal de Goi\u00e1s<\/p>\n Projeto: Express\u00e3o heter\u00f3loga de genes de LPMOs f\u00fangicas na levedura Pichia pastoris<\/em><\/p>\n A preocupa\u00e7\u00e3o com a polui\u00e7\u00e3o ambiental e depend\u00eancia de combust\u00edveis f\u00f3sseis levou \u00e0 busca por combust\u00edveis renov\u00e1veis como o etanol produzido a partir de biomassa vegetal. Para o processo de desconstru\u00e7\u00e3o da biomassa vegetal e obten\u00e7\u00e3o de a\u00e7\u00facares ferment\u00e1veis \u00e9 fundamental o uso de enzimas lignocelulol\u00edticas, em especial das LPMOs, pela capacidade de acelerar a convers\u00e3o enzim\u00e1tica da biomassa, reduzindo tempo e custo de produ\u00e7\u00e3o. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi expressar genes de LPMOs TlAA9 <\/em>de Thermomyces lanuginosus <\/em>e Af-egl61<\/em> de Aspergillus fumigatus<\/em> (X7) na levedura P. pastoris<\/em>. Para isso, c\u00e9lulas de E. coli <\/em>XL10-GOLD foram transformadas com o vetor pGAPZ\/TlAA9 ou pHIL-D2\/Af-egl61 por eletropora\u00e7\u00e3o. Os vetores pGAPZ\/TlAA9 e pHIL-D2\/Af-egl61 foram linearizados com as enzimas Avr<\/em>II e Not<\/em>I, respectivamente, e inseridos em c\u00e9lulas de P. pastoris <\/em>SMD1168 por eletropora\u00e7\u00e3o. Os transformantes obtidos foram cultivados em placas do tipo deep well <\/em>e em frascos. <\/em>An\u00e1lises por western blot<\/em> e SDS-PAGE confirmaram a presen\u00e7a da LPMO TLAA9r no sobrenadante de cultura do T14. A enzima TLAA9r purificada em coluna de n\u00edquel apresentou uma massa molecular de aproximadamente 55 kDa. \u00a0O sobrenadante de cultura do E11 apresentou duas bandas intensas entre 48 kDa e 66,2 kDa, indicando a prov\u00e1vel presen\u00e7a da LPMO AF-EGL61r. Neste trabalho \u00e9 relatado pela primeira vez a express\u00e3o de uma LPMO de T. lanuginosa <\/em>em P. pastoris<\/em>.<\/p>\n Bolsa: \u00a0N\u00e3o<\/p>\n 2- P\u00f3s-gradua\u00e7\u00e3o<\/strong><\/p>\n – N\u00edvel Mestrado:<\/p>\n Curso: Bioqu\u00edmica e Biologia Molecular<\/p>\n IES: Escola de Artes, Ci\u00eancias e Humanidades – USP.<\/p>\n Ano de ingresso: 2020<\/p>\n Ano de t\u00e9rmino ou conclus\u00e3o no programa: 2022<\/p>\n Projeto: Caracteriza\u00e7\u00e3o de glicosil hidrolases envolvidas na degrada\u00e7\u00e3o da biomassa lignocelul\u00f3sica<\/strong><\/p>\n Em virtude dos problemas ambientais e econ\u00f4micos causados pelos combust\u00edveis f\u00f3sseis, uma importante alternativa ao seu uso s\u00e3o os biocombust\u00edveis, como o etanol 2G, produzido a partir da biomassa vegetal. Para o processo de desconstru\u00e7\u00e3o da biomassa vegetal e obten\u00e7\u00e3o de a\u00e7\u00facares ferment\u00e1veis \u00e9 fundamental o uso de enzimas lignocelulol\u00edticas, como por exemplo, as \u03b1-L-arabinofuranosidases e endo-\u03b1-1,5-L-arabinanases. O presente trabalho tem como objetivo caracterizar as enzimas hemicelulases recombinantes \u03b1-L-arabinofuranosidase-1, \u03b1-L-arabinofuranosidase-2 e endo-\u03b1-1,5-L-arabinanase de Xanthomonas phaseoli <\/em>pv. Phaseoli, Thermobifida fusca <\/em>YX e Geobacillus <\/em>sp. JS12, respectivamente, produzidas em E. coli<\/em>. As prote\u00ednas expressas em E. coli<\/em> ser\u00e3o purificadas por cromatografia de afinidade e caracterizadas quanto a especificidade de substrato, influ\u00eancia do pH, temperatura, \u00edons met\u00e1licos e reagentes qu\u00edmicos na atividade enzim\u00e1tica e par\u00e2metros cin\u00e9ticos. O projeto pretende determinar as condi\u00e7\u00f5es \u00f3timas e os par\u00e2metros cin\u00e9ticos de atua\u00e7\u00e3o das enzimas recombinantes, a fim de contribuir com o avan\u00e7o tecnol\u00f3gico nacional, com a produ\u00e7\u00e3o de enzimas capazes de atuar de modo eficiente na desconstru\u00e7\u00e3o da biomassa vegetal.<\/p>\n Bolsa Agencia: CAPES<\/p>\n Processo:<\/p>\n Vig\u00eancia: 01\/03\/2020 – 28\/02\/2022<\/p>\n Publica\u00e7\u00f5es:<\/strong><\/p>\n <\/p>\n Participa\u00e7\u00e3o em eventos:<\/strong><\/p>\n <\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" Biotecnologista pela Universidade Federal de Goi\u00e1s (UFG). Atualmente mestranda do programa de Bioqu\u00edmica e Biologia Molecular da Universidade de S\u00e3o Paulo (USP). Possui como projeto de pesquisa a purifica\u00e7\u00e3o e caracteriza\u00e7\u00e3o de enzimas lignocelul\u00edticas, sob a orienta\u00e7\u00e3o do prof. Dr. Felipe Chambergo. 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