{"id":345,"date":"2026-07-02T12:09:47","date_gmt":"2026-07-02T14:09:47","guid":{"rendered":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/?page_id=345"},"modified":"2026-07-02T12:19:13","modified_gmt":"2026-07-02T14:19:13","slug":"experimento-2","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/protocolo\/experimento-2\/","title":{"rendered":"Experimento 2"},"content":{"rendered":"<p>\nNeste experimento, os alunos aprofundam os conceitos desenvolvidos anteriormente ao calcular a concentra\u00e7\u00e3o celular de col\u00f4nias individuais de <i>Saccharomyces cerevisiae<\/i>. A atividade integra matem\u00e1tica e microbiologia por meio de dilui\u00e7\u00f5es seriadas, c\u00e1lculos de \u00e1rea, volume, pot\u00eancia e an\u00e1lise de dados experimentais. Al\u00e9m disso, os estudantes medem o di\u00e2metro das col\u00f4nias e relacionam essas medidas com a concentra\u00e7\u00e3o celular, construindo interpreta\u00e7\u00f5es gr\u00e1ficas a partir dos resultados obtidos no laborat\u00f3rio.\n<\/p>\n<h3>Materiais e Equipamentos<\/h3>\n<ul>\n<li>Placas de Petri com meio YPD<\/li>\n<li>Microtubos<\/li>\n<li>Micropipeta<\/li>\n<li>Ponteiras<\/li>\n<li>Estante<\/li>\n<li>Al\u00e7a de Drigalski<\/li>\n<li>Colherzinha de pl\u00e1stico<\/li>\n<li>R\u00e9gua<\/li>\n<li>Caneta permanente<\/li>\n<li>Peda\u00e7o circular de EVA<\/li>\n<li>Solu\u00e7\u00e3o salina 0,9%<\/li>\n<\/ul>\n<h3>Procedimento Experimental<\/h3>\n<ol>\n<li>Cada grupo receber\u00e1 1 placa de meio contendo col\u00f4nias isoladas de <i>S. cerevisiae<\/i> ou utilizar\u00e1 1 ou mais placas do Experimento 1.<\/li>\n<li>Selecione 3 col\u00f4nias bem isoladas, ou seja, sem outras col\u00f4nias muito pr\u00f3ximas. Preferencialmente, escolha col\u00f4nias de di\u00e2metros diferentes e utilize uma caneta para desenhar um quadrado ao redor de cada uma. <strong>IMPORTANTE:<\/strong> N\u00e3o desenhe o quadrado muito rente \u00e0 col\u00f4nia.<\/li>\n<li>Identifique as col\u00f4nias escrevendo ao lado de cada quadrado marcado: C1, C2 e C3.<\/li>\n<li>Coloque a placa com as col\u00f4nias marcadas sobre o c\u00edrculo de EVA. Posicione uma r\u00e9gua pr\u00f3xima \u00e0 placa e fotografe o conjunto placa+r\u00e9gua.<\/li>\n<li>Veja na se\u00e7\u00e3o <a href=\"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/medir\/\">Medir col\u00f4nias<\/a> como medir o di\u00e2metro da col\u00f4nia na fotografia.<\/li>\n<li>Com o di\u00e2metro da col\u00f4nia calculado, defina qual dilui\u00e7\u00e3o ser\u00e1 usada para cada col\u00f4nia com base na tabela abaixo.<\/li>\n<\/ol>\n<p align=\"center\">\n<a href=\"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-content\/uploads\/sites\/1447\/2026\/07\/tabela.png\"><img decoding=\"async\" src=\"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-content\/uploads\/sites\/1447\/2026\/07\/tabela-300x117.png\" alt=\"\" width=\"300\" height=\"117\" class=\"alignnone size-medium wp-image-347\" srcset=\"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-content\/uploads\/sites\/1447\/2026\/07\/tabela-300x117.png 300w, https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-content\/uploads\/sites\/1447\/2026\/07\/tabela.png 382w\" sizes=\"(max-width: 300px) 100vw, 300px\" \/><\/a>\n<\/p>\n<ol start=\"7\">\n<li>Na lateral dos microtubos contendo 0,9 ml de solu\u00e7\u00e3o salina, na parte fosca, indique a dilui\u00e7\u00e3o que ser\u00e1 feita em cada microtubo (10<sup>\u22121<\/sup>, 10<sup>\u22122<\/sup>, 10<sup>\u22123<\/sup> ou 10<sup>\u22124<\/sup>). H\u00e1 3 microtubos, contendo 1 ml de salina cada, que foram pr\u00e9-marcados como C1, C2 e C3. Acomode-os na estante de microtubos, todos na mesma fileira.<\/li>\n<li>Com o aux\u00edlio de uma colherzinha de pl\u00e1stico, retire a col\u00f4nia demarcada no passo 2 e transfira-a para o microtubo C1.<\/li>\n<li>Agite bem o microtubo, at\u00e9 que a col\u00f4nia se desfa\u00e7a por completo. Isso pode ser observado pelo aumento da turbidez da suspens\u00e3o. Aten\u00e7\u00e3o: o \u00e1gar n\u00e3o ir\u00e1 se desfazer por completo, restando pequenos peda\u00e7os de \u00e1gar na suspens\u00e3o.<\/li>\n<li>Com o aux\u00edlio de uma micropipeta, insira a ponteira na suspens\u00e3o de leveduras, puxe delicadamente 100 \u00b5l e feche o microtubo. Aten\u00e7\u00e3o: cuidado para n\u00e3o coletar peda\u00e7os de \u00e1gar.<\/li>\n<li>Transfira os 100 \u00b5l para o microtubo de dilui\u00e7\u00e3o 10<sup>\u22121<\/sup> e feche a tampa do microtubo rapidamente. Ap\u00f3s depositar o conte\u00fado da micropipeta no microtubo, mude-o para a fileira da frente (ou de tr\u00e1s) da estante. Descarte a ponteira.<\/li>\n<li>Para as seguintes dilui\u00e7\u00f5es, HOMOGENIZE a suspens\u00e3o contendo a dilui\u00e7\u00e3o 10<sup>\u22121<\/sup> e transfira 100 \u00b5l para o pr\u00f3ximo microtubo na sequ\u00eancia de dilui\u00e7\u00f5es. Repita o processo de dilui\u00e7\u00f5es at\u00e9 transferir para o \u00faltimo microtubo. Lembre que a dilui\u00e7\u00e3o final ser\u00e1 10<sup>\u22122<\/sup>, 10<sup>\u22123<\/sup> ou 10<sup>\u22124<\/sup>.<\/li>\n<li>Plaqueamento das dilui\u00e7\u00f5es: Homogenize bem os microtubos, aspire 100 \u00b5l da dilui\u00e7\u00e3o final e deposite sobre o meio de cultura nas placas de Petri marcada com C1.<\/li>\n<li>Com o aux\u00edlio da al\u00e7a de Drigalski, espalhe o l\u00edquido delicadamente sobre o meio de cultura. <strong>IMPORTANTE:<\/strong> Espalhe at\u00e9 secar.<\/li>\n<li>Repita o processo de retirada, suspens\u00e3o, dilui\u00e7\u00e3o e plaqueamento das col\u00f4nias C2 e C3.<\/li>\n<li>Deixe as placas com a tampa invertida e incube na estufa a 37\u25e6C at\u00e9 que surjam col\u00f4nias com pelo menos 1\u20132 mm de di\u00e2metro (geralmente em at\u00e9 36 h).<\/li>\n<li>Na aula seguinte, conte as col\u00f4nias em cada uma das placas.<\/li>\n<\/ol>\n<h3>V\u00eddeo do Experimento<\/h3>\n<p><iframe\nwidth=\"100%\"\nheight=\"500\"\nsrc=\"https:\/\/www.youtube.com\/embed\/FuSIFBIwA44\"\nstyle=\"border:0;\"\nallowfullscreen><br \/>\n<\/iframe><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Neste experimento, os alunos aprofundam os conceitos desenvolvidos anteriormente ao calcular a concentra\u00e7\u00e3o celular de [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":25254,"featured_media":0,"parent":62,"menu_order":3,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"footnotes":"","_links_to":"","_links_to_target":""},"class_list":["post-345","page","type-page","status-publish","hentry"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/345","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-json\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-json\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-json\/wp\/v2\/users\/25254"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=345"}],"version-history":[{"count":5,"href":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/345\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":353,"href":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/345\/revisions\/353"}],"up":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/62"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/sites.usp.br\/micromat\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=345"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}