Biotecnologista pela Universidade Federal de Goiás (UFG). Atualmente mestranda do programa de Bioquímica e Biologia Molecular da Universidade de São Paulo (USP). Possui como projeto de pesquisa a purificação e caracterização de enzimas lignocelulíticas, sob a orientação do prof. Dr. Felipe Chambergo. Tem interesse nas áreas de microbiologia aplicada, bioprocessos, biologia molecular, biologia celular e bioquímica.
N° USP: 11866640
E-mail USP: vandy.melo@usp.br
N° ORCID:
Formação
1- Graduação: Bacharel em Biotecnologia
Data de conclusão: 28/01/2020
IES: Universidade Federal de Goiás
Projeto: Expressão heteróloga de genes de LPMOs fúngicas na levedura Pichia pastoris
A preocupação com a poluição ambiental e dependência de combustíveis fósseis levou à busca por combustíveis renováveis como o etanol produzido a partir de biomassa vegetal. Para o processo de desconstrução da biomassa vegetal e obtenção de açúcares fermentáveis é fundamental o uso de enzimas lignocelulolíticas, em especial das LPMOs, pela capacidade de acelerar a conversão enzimática da biomassa, reduzindo tempo e custo de produção. Nesse sentido, o objetivo desse trabalho foi expressar genes de LPMOs TlAA9 de Thermomyces lanuginosus e Af-egl61 de Aspergillus fumigatus (X7) na levedura P. pastoris. Para isso, células de E. coli XL10-GOLD foram transformadas com o vetor pGAPZ/TlAA9 ou pHIL-D2/Af-egl61 por eletroporação. Os vetores pGAPZ/TlAA9 e pHIL-D2/Af-egl61 foram linearizados com as enzimas AvrII e NotI, respectivamente, e inseridos em células de P. pastoris SMD1168 por eletroporação. Os transformantes obtidos foram cultivados em placas do tipo deep well e em frascos. Análises por western blot e SDS-PAGE confirmaram a presença da LPMO TLAA9r no sobrenadante de cultura do T14. A enzima TLAA9r purificada em coluna de níquel apresentou uma massa molecular de aproximadamente 55 kDa. O sobrenadante de cultura do E11 apresentou duas bandas intensas entre 48 kDa e 66,2 kDa, indicando a provável presença da LPMO AF-EGL61r. Neste trabalho é relatado pela primeira vez a expressão de uma LPMO de T. lanuginosa em P. pastoris.
Bolsa: Não
2- Pós-graduação
– Nível Mestrado:
Curso: Bioquímica e Biologia Molecular
IES: Escola de Artes, Ciências e Humanidades – USP.
Ano de ingresso: 2020
Ano de término ou conclusão no programa: 2022
Projeto: Caracterização de glicosil hidrolases envolvidas na degradação da biomassa lignocelulósica
Em virtude dos problemas ambientais e econômicos causados pelos combustíveis fósseis, uma importante alternativa ao seu uso são os biocombustíveis, como o etanol 2G, produzido a partir da biomassa vegetal. Para o processo de desconstrução da biomassa vegetal e obtenção de açúcares fermentáveis é fundamental o uso de enzimas lignocelulolíticas, como por exemplo, as α-L-arabinofuranosidases e endo-α-1,5-L-arabinanases. O presente trabalho tem como objetivo caracterizar as enzimas hemicelulases recombinantes α-L-arabinofuranosidase-1, α-L-arabinofuranosidase-2 e endo-α-1,5-L-arabinanase de Xanthomonas phaseoli pv. Phaseoli, Thermobifida fusca YX e Geobacillus sp. JS12, respectivamente, produzidas em E. coli. As proteínas expressas em E. coli serão purificadas por cromatografia de afinidade e caracterizadas quanto a especificidade de substrato, influência do pH, temperatura, íons metálicos e reagentes químicos na atividade enzimática e parâmetros cinéticos. O projeto pretende determinar as condições ótimas e os parâmetros cinéticos de atuação das enzimas recombinantes, a fim de contribuir com o avanço tecnológico nacional, com a produção de enzimas capazes de atuar de modo eficiente na desconstrução da biomassa vegetal.
Bolsa Agencia: CAPES
Processo:
Vigência: 01/03/2020 – 28/02/2022
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